一つ一つのマイクロウェルの底部に約 2 μm の貫通孔が形成されています。中央のチャンバー部分に入れた細胞を含む溶液は、サイドポートからピペットで吸引することで吸い出すことができます。

細胞は上から下に向かう溶液の流れに乗って、マイクロウェルに格納されます。

Step 1

細胞の懸濁液を中央のチャンバーに入れます

Step 2

サイドポートからバッファーを吸い出します

フィルターの直径は約 2 μm。培地やPBS、バッファーといった液性成分だけが通過します。細胞はフィルター上に捕捉されており、染色や洗浄操作でもロスしません。

したがって、血中循環がん細胞CTC（ circulating tumor cell）のような希少な細胞を操作中に失うことなく、細胞の固定、透過、ブロッキング、インキュベーション、洗浄が可能です。

Step 1

A549細胞の播種、格納

Step 2

FITC標識マウス抗ヒトEpCAM抗体を添加し、30分間インキュベーション

Step 3

過剰な抗体を洗浄して除去。蛍光強度が非常に低く、検出が困難。

Step 4

Alexa® 488標識ヤギ抗マウスIgG抗体を添加し、30分間インキュベーション。

Step 5

過剰の抗体を洗浄して除去。蛍光標識2次抗体による2回目の染色で、蛍光強度が増強。さらなる追加染色で蛍光強度の増強が可能。

SIEVEWELL™の透明フィルターには、細胞サイズのマイクロウェルが形成されています

– マイクロウェルのサイズ; 20 μm, 深さは 25 μm.

– 370,000ウェルが17 mm x 17 mmに形成

ウェルの底部に貫通孔が形成されています。細胞が貫通孔に向かって吸引されてゆき、ウェルに格納されます。そのため、シングルセル格納率はポアソン分布よりも高く、200,000個の細胞をロードした場合、90%以上のウェルが１ウェル1細胞となります。

自家蛍光が細胞の検出や観察の問題となることがありますが、SIEVEWELL™のフィルターの自家蛍光は極め低く、一般的な蛍光顕微鏡での 観察を妨げることはありません。