好中球細胞外トラップの検出

HL-60 ヒト前骨髄性白血病細胞株を1.3% DMSO添加RPMI1640培地で3日間培養し、分化誘導を行った。分化したHL-60細胞を細胞膜透過性色素であるNUCLEAR-ID Red DNA dyeで核を染色した。過剰の色素を洗浄除去した後、NUCLEAR-ID Redで染色した好中球をSIEVEWELLにロードした。Sytox Green (0.2 µM) と 100 ng/mL PMA を添加したRPMI培地を重層し NETosis を誘導した。細胞を播種したSIEVEWELLを IncuCyte® S3 システムに入れ、37°C 5% CO2 下で培養した。20倍レンズで5分ごとに位相差、赤 (800 ms 露光時間)、緑(400 ms 露光時間) の3チャネルで撮影した。>リアルタイムイメージング


赤血球を溶血して得られたヒト白血球をSIEVEWELLに播種し、各ウェルに細胞を格納した。100 ng/mL PMAを含むRPMI培地で4時間培養し、NETsを誘導した。培地を吸引除去したのち、ウサギ抗MPOポリクローナル抗体を添加したPBSをロードし、30分間染色した。抗体を洗浄後、Alexa 488標識抗 ウサギIgG抗体およびSytox Orangeを添加したPBSをロードし、30分間染色した。染色後、未反応の試薬を洗浄により除去し、蛍光顕微鏡にて撮影した。


HL-60 ヒト前骨髄性白血病細胞株を1.3% DMSO添加RPMI1640培地で3日間培養し、好中球への分化誘導を行った。分化したHL-60細胞をSIEVEWELLに播種し、各ウェルに細胞を格納した。100 ng/mL PMAを含むRPMI培地で4時間培養し、NETsを誘導した。培地を吸引除去したのち、ウサギ抗MPOポリクローナル抗体を添加したPBSをロードし、30分間染色した。抗体を洗浄後、Alexa 488標識抗 ウサギIgG抗体およびSytox Orangeを添加したPBSをロードし、30分間染色した。染色後、未反応の試薬を洗浄により除去し、蛍光顕微鏡にて撮影した。

Privacy Settings
We use cookies to enhance your experience while using our website. If you are using our Services via a browser you can restrict, block or remove cookies through your web browser settings. We also use content and scripts from third parties that may use tracking technologies. You can selectively provide your consent below to allow such third party embeds. For complete information about the cookies we use, data we collect and how we process them, please check our Privacy Policy
Youtube
Consent to display content from - Youtube
Vimeo
Consent to display content from - Vimeo
Google Maps
Consent to display content from - Google
Spotify
Consent to display content from - Spotify
Sound Cloud
Consent to display content from - Sound